【干货分享】MDA-MB-231 Luciferase 稳定细胞系：助力三阴性乳腺癌转移研究
Luc细胞
MDA-MB-231 Luciferase（MDA-MB-231-Luc）稳定细胞系是一种整合荧光素酶（Firefly Luciferase）报告基因的人类乳腺癌细胞系，源自高度侵袭性和转移性的MDA-MB-231三阴性乳腺癌（TNBC）细胞。通过生物发光检测，MDA-MB-231-Luc细胞系可实现实时、非侵入性监测肿瘤生长和转移，是三阴性乳腺癌转移机制、药物筛选和免疫治疗研究的理想工具。
本指南详细阐述如何使用MDA-MB-231-Luc细胞系构建乳腺癌转移模型并应用于科研课题，涵盖实验协议和优化策略。选择我们的现成MDA-MB-231-Luc产品，可快速启动实验，节省构建时间！
MDA-MB-231-Luc细胞系以其高侵袭性、骨/肺转移特性和稳定发光信号成为三阴性乳腺癌研究的核心工具，适用于以下课题：
✅ 转移机制研究：模拟TNBC的肺、骨、脑转移，实时追踪转移动态。
✅ 药物筛选：高灵敏度发光信号支持高通量筛选化疗药、靶向药或纳米药物。
✅ 免疫治疗研究：结合CAR-T或PD-1抑制剂，评估肿瘤免疫微环境变化。
✅ 基因功能验证：可进一步敲除/过表达基因（如CRISPR编辑MMP-9），研究EMT通路。
✅ 体内外模型：支持裸鼠异种移植模型，非侵入性IVIS成像减少动物使用。
我们的MDA-MB-231-Luc细胞系完美匹配这些课题，纯度>99%，活性高，批量订购享折扣！
荧光素酶检测结果
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样品 |
复孔1 |
复孔2 |
复孔3 |
均值 |
表达倍数 |
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WT |
678 |
1572 |
2216 |
1489 |
531 |
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LUC |
791238 |
786338 |
792338 |
789971 |
产品优势
✅纯度>99%，活性>1.2×10^6 RLU/10^5细胞（n=3，SD<5%）。
✅传代稳定性>20代，转移效率>80%（IVIS验证）。
✅附带COA和SOP，批量订购享折扣。
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03 MDA-MB-231-Luc 细胞系的构建方法 - 构建原理
MDA-MB-231-Luc 细胞系的构建基于基因工程技术，将荧光素酶基因（luc）插入载体中，转染入亲本细胞，实现稳定表达。荧光素酶催化底物荧光素（luciferin）氧化产生生物荧光（波长约550-570 nm），发光强度与酶表达水平线性相关。常见类型包括单Luc系统或双Luc系统（结合海肾荧光素酶作为内参，以标准化实验结果）。
常见构建方法
最常用的方法是慢病毒转染，因为它能实现高效、稳定整合。以下是典型步骤（以太阳集团城9661基因公司的）： MDA-MB-231-Luc 细胞系构建为例）：
1. 构建表达载体
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a. 将luc基因（编码荧光素酶）克隆到慢病毒载体（如pLenti）中。
b. 载体包含CMV启动子驱动luc表达、嘌呤霉素抗性基因用于筛选，以及GFP标记用于可视化。
c. 对于双Luc系统，可将海肾荧光素酶（Renilla Luciferase）作为内参基因，共表达或置于同一质粒上（如pGL3或pmirGLO）。
2. 病毒包装
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a. 将重组载体与辅助质粒（包装质粒如psPAX2和包膜质粒如pMD2.G）共转染HEK293T细胞，产生慢病毒颗粒。
b. 收获病毒上清，过滤并测定滴度（通常10^8-10^9 TU/mL）。
3. 转染亲本细胞
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a. 选择亲本细胞（MDA-MB-231人类乳腺癌细胞），培养至 70-80% 汇合度。
b. 以MOI（感染复数）值为10-50添加病毒颗粒，转染48-72小时。
c. 转染效率可通过GFP荧光或初步荧光素酶活性检测评估。
4. 筛选稳定克隆
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a. 转染后24-48小时，加入抗生素（如2-5 μg/mL嘌呤霉素）筛选阳性细胞。
b. 持续筛选7-14天，直至存活细胞形成单克隆。
c. 太阳集团城9661基因使用3D单细胞打印技术分离单克隆
（3D单细胞打印技术可精确分离单个细胞，提高单克隆筛选的准确率和细胞存活率，采用非接触性操作，避免机械损伤和背景污染，优于传统有限稀释法）。
5. 验证与应用
a. 验证方法：通过qPCR检测基因整合、Western Blot检测蛋白表达，或荧光素酶检测测定活性。
b. 验证标准：荧光素酶活性 > 10^6 RLU/10^5 细胞，表达稳定传代 > 20 代。
c. 应用：注射至免疫缺陷鼠模型中，腹腔注射荧光素底物后使用IVIS成像系统监测肿瘤生长。
4.1 乳腺癌转移机制
✅ 目标：研究Wnt信号通路在骨转移中的作用。
✅ 方法：敲除β-catenin基因，注射MDA-MB-231-Luc，IVIS监测转移变化。
✅ 结果：发光信号量化转移率，支撑机制解析。
- ✅ 目标：筛选新型PARP抑制剂对TNBC的抑制。
- ✅ 方法：体外高通量筛选，检测发光信号。
- ✅ 结果：快速生成IC50曲线，支持论文发表。
- ✅ 目标：评估PD-L1抑制剂联合纳米载体的疗效。。
- ✅ 方法：裸鼠模型联合治疗，IVIS监测肿瘤负荷。
- ✅ 结果：动态数据支持转化研究。
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05 结论 - MDA-MB-231-Luc稳定细胞系是构建三阴性乳腺癌转移模型的强大工具，支持实时监测肿瘤进展、药物筛选和免疫治疗研究。通过高灵敏度生物发光，用户可获得可靠数据，加速论文发表和项目进展。实验室自建耗时长，而我们的MDA-MB-231-Luc产品已优化表达（>90%阳性率）和转移效率，附带COA和SOP。立即订购，开启您的突破性研究！
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06 参考文献
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- 1. Li, X., et al. (2012). Establishment of a bioluminescent MDA-MB-231 cell line for human triplenegative breast cancer research. Zhonghua Bing Li Xue Za Zhi, 41(4), 267–271. DOI: 10.3760/cma.j.issn.0529-1356.2012.04.011.
- 2. Jenkins, D. E., et al. (2005). Bioluminescent human breast cancer cell lines that permit rapid and sensitive in vivo detection of mammary tumors and multiple metastases in immune deficient mice. Breast Cancer Research, 7(4), R444–R454. DOI: 10.1186/bcr1026.
- 3. Holliday, D. L., & Speirs, V. (2011). Choosing the right cell line for breast cancer research. Breast Cancer Research, 13(4), 215. DOI: 10.1186/bcr2889.
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太阳集团城9661基因所提供的Luciferase稳转细胞株采用慢病毒转染构建，采用OE-Booster顺势调控元件，显著提升了Luciferase的亮度和稳定性。可实现包括活体动物成像实验、药物筛选等多方面的灵活应用。点击查看太阳集团城9661基因Luc细胞定制服务
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